丹皮酚在LL-37诱导的玫瑰痤疮样小鼠中减轻皮损，并与S100A9-NF-κB信号受抑相关
核心概要
该研究以网络药理学预测丹皮酚与玫瑰痤疮的共同靶点，并在LL-37诱导的玫瑰痤疮样BALB/c小鼠模型中验证：150 mg/kg丹皮酚显著降低红斑面积与评分、减轻炎症细胞与CD4+ T细胞浸润及血管生成，同时下调S100A9与p65磷酸化，提示其疗效与S100A9-NF-κB信号受抑相关。
FIGURE 1 The interaction of mice and the network pharmacology of Pae and rosacea. (a) All groups were shaved 24 h before treatment. The model groups were injected intradermally on the back skin with LL-37 (40 mL, 320 mM) four times at intervals of 12 h. The control groups were also administered intradermal injections of PBS (40 mL) at the same frequency as the model groups. The DH and Pae groups received the first intradermal injection of an equivalent volume of LL-37 (320 mM). After the first interval of 12 h, the first injection was repeated in the DH and Pae groups, and the first intraperitoneal injection was performed at 30 mg/kg for DH and 50, 100, and 150 mg/kg for Pae. The DH and Pae groups were administered a third intradermal injection of LL-37 after the second interval of 12 h. At 12 h, the DH and Pae groups received the final intradermal and intraperitoneal injections at the same dose as the first intradermal and intraperitoneal injections. Then, 12 h after the last injection, all mice were sacrificed. (b) The heatmap shows the differentially expressed genes in rosacea. Red indicates upregulated differentially expressed genes, and green indicates downregulated differentially expressed genes. (c) The volcano plot illustrates differentially expressed genes. (d) The Venn diagram illustrates Pae- related targets and rosacea-related targets. (e) PPI network for overlapping proteins between Pae-related targets and rosacea-related targets. (f) Simplified PPI network for the overlapping proteins (larger circles and brighter colors indicate closer interactions).
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网络药理学分析在96个丹皮酚作用靶点与913个玫瑰痤疮相关差异基因之间找到11个交集靶点，PPI网络（11个节点、396条边）中排序最前的三个关键靶点为CXCL8、IL-1β和CCL2。 此前尚无关于丹皮酚用于玫瑰痤疮的报道，该工作首次把丹皮酚的药理靶点谱与玫瑰痤疮差异表达谱做交集，给出候选分子清单。 基于PubChem、TCMSP、HIT、BATMAN 2.0、Swiss Target Prediction与GEO数据集GSE65914（10名健康志愿者与19名玫瑰痤疮患者）的数据库整合与STRING/Cytoscape网络分析，属计算预测，作者亦说明需动物实验确认。
在LL-37诱导的玫瑰痤疮样小鼠中，150 mg/kg丹皮酚使平均红斑面积由11.97 ± 3.73 mm²降至0.35 ± 0.23 mm²、红斑评分由2.63 ± 0.59降至1.00 ± 0.38（均p < 0.05），而50与100 mg/kg组在红斑面积与评分上未达显著改善（p > 0.05）。 该结果为丹皮酚在玫瑰痤疮样皮损中的剂量相关疗效提供了体内表型证据，并显示高剂量组在组织学上接近对照组（p > 0.05）。 42只雌性BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、多西环素组与三个丹皮酚剂量组（每组n = 7），连续两天每日给药一次，末次注射后12小时按红斑强度与面积评分并拍照，样本量依据功效分析确定。
丹皮酚干预伴随皮肤CD31、CD4+ T细胞与肥大细胞浸润的下降，其中150 mg/kg组CD31显著降低（p < 0.01），100与150 mg/kg组CD4+ T细胞显著降低（均p < 0.01）。 把丹皮酚的作用从单纯抗炎扩展到血管与适应性免疫层面，与玫瑰痤疮的血管与免疫异常特征相对应。 免疫荧光（CD31、CD4）与甲苯胺蓝染色（肥大细胞，每视野200×计数5个视野）的组织学定量，属相关性观察。
丹皮酚（100与150 mg/kg）显著降低S100A9表达并抑制p65磷酸化，150 mg/kg效果强于100 mg/kg；作者据此提出疗效与S100A9-NF-κB信号受抑相关。 将网络药理学提示的靶点与体内S100A9-NF-κB轴联系起来，为后续机制研究提供方向。 免疫荧光、RT-qPCR、ELISA与Western blot多方法一致显示S100A9与p-P65变化，但作者明确指出该机制目前仅有相关性证据，尚缺体外功能验证。
启示与展望
该研究面向玫瑰痤疮炎症干预的药物发现前期阶段：网络药理学与分子对接用于生成候选靶点假设，LL-37诱导的BALB/c小鼠模型用于在体表型与信号验证。对读者而言，其价值在于提供丹皮酚剂量-效应与S100A9-NF-κB轴的初步线索，可供后续机制实验、制剂开发或联合用药设计参考；作者也指出丹皮酚可能作为替代或联合干预的候选，而非多西环素的替代品。
作者自述的边界包括：LL-37模型为48小时急性炎症模型，长期疗效、安全性与毒性尚未验证；S100A9-NF-κB机制仅有相关性证据，缺乏体外功能验证；PPAR-γ相关机制未在本文范围内表征；S100A9-IL-17与TLR4/MyD88依赖级联是否参与丹皮酚改善玫瑰痤疮样皮损亦未实验验证。此外，本次载入文本为不完整阅读范围，部分图表内容（如Figure 1–5的具体图像与完整统计细节）未包含在文本中，因此对个别数值与组间比较的完整解读仍以原文图表为准。