CAR信号域砍到45个氨基酸：Canelé用智能体设计，表面表达反超BBζ
核心概要
Canelé团队用AI智能体编排的理性设计流程重构CAR胞内信号域，把第二代BBζ信号域压缩到54个氨基酸的Stoat，再迭代出45个氨基酸的Happy Stoat。在相同mRNA剂量下，Happy Stoat在T细胞表面的CAR表达量高于BBζ和Stoat，细胞因子释放更强，并在转染数日后以更低的效靶比杀伤靶细胞。五名供体上，Happy Stoat以更低mRNA剂量达到与BBζ相当的B细胞清除。
深度剖析
CAR的胞内信号域可以比现行第二代设计短得多，而免疫激活功能不减。 此前CAR工程多集中在胞外结合端，信号域基本沿用少数成熟设计，例如把4-1BB共刺激与CD3ζ激活组合起来的BBζ。 由Opus 4.6执行的一个设计只有54个氨基酸、约为BBζ信号域长度的三分之一，其IFN-γ释放量高于BBζ，杀伤能力与之相当。
进一步压缩到45个氨基酸的Happy Stoat把优势落在表面表达上。 团队把表面表达认定为Happy Stoat的关键优势，而非单纯缩短序列。 在相同mRNA剂量下，Happy Stoat在T细胞表面的CAR表达量高于BBζ和Stoat，并在各mRNA剂量与效靶比下带来更强的细胞因子释放。
表达优势延续为杀伤与持久性优势。 BBζ在转染第一天即达到的表达水平，Happy Stoat用一周时间达到相近水平。 时间进程实验中Happy Stoat的高表达维持时间远长于BBζ；Happy Stoat能在比BBζ更低的效靶比下杀伤，差距在转染数日后更明显。
压缩后的信号域在供体层面表现出剂量优势。 比较对象仍是第二代BBζ构建体。 在五名供体上，Happy Stoat以更低的mRNA剂量达到与BBζ相当的B细胞清除。
启示与展望
已展示的范围是体外与离体实验：合成构建体在T细胞上的表面表达、细胞因子释放、杀伤与效靶比比较，以及五名供体上的B细胞清除；体内递送仍处于推进阶段。
作者称Happy Stoat只是揭示了这一序列空间的一角，并继续验证和优化这些重构信号域；体内结果尚未给出。与Anthropic合作开展的抗原组合筛选，作者预期在六个月内得到实验结果。